फ्लोरोफोरे: Difference between revisions

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|-
! Dye
! रंजक
! Ex (nm)
! Ex (nm)
! Em (nm)
! Em (nm)
! MW
! MW
! Notes
! टिप्पणियाँ
|-
|-
| [[Hydroxycoumarin]]
| [[Hydroxycoumarin|हाइड्रोक्सीकाउमारिन]]
| 325
| 325
| 386
| 386
| 331
| 331
| Succinimidyl ester
| सक्सिनिमिडाइल एस्टर
|-
|-
| [[Aminocoumarin]]
| [[Aminocoumarin|एमिनोकूमरिन]]
| 350
| 350
| 445
| 445
| 330
| 330
| Succinimidyl ester
| सक्सिनिमिडाइल एस्टर
|-
|-
| [[Methoxycoumarin]]
| [[Methoxycoumarin|मेथोक्सीकूमरिन]]
| 360
| 360
| 410
| 410
| 317
| 317
| Succinimidyl ester
| सक्सिनिमिडाइल एस्टर
|-
|-
| [[Cascade Blue]]
| [[Cascade Blue|कैस्कैड नील]]
| (375);401
| (375);401
| 423
| 423
| 596
| 596
| Hydrazide
| हाइड्रैज़ाइड
|-
|-
| [[Pacific Blue (dye)|Pacific Blue]]
| [[Pacific Blue (dye)|प्रशांत नीला]]
| 403
| 403
| 455
| 455
| 406
| 406
| Maleimide
| मैलेमाइड
|-
|-
| [[Pacific Orange]]
| [[Pacific Orange|प्रशांत नारंगी]]
| 403
| 403
| 551
| 551
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|  
|  
|-
|-
| [[3-Hydroxyisonicotinaldehyde]]
| [[3-Hydroxyisonicotinaldehyde|3-हाइड्रोक्सीसोनिकोटिनल्डिहाइड]]
| 385
| 385
| 525
| 525
| 123
| 123
| QY 0.15; pH sensitive
| QY 0.15; pH संवेदनशील
|-
|-
| [[Lucifer yellow]]
| [[Lucifer yellow|लूसिफर पीला]]
| 425
| 425
| 528
| 528
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| NBD-X
| NBD-X
|-
|-
| [[R-Phycoerythrin]] (PE)
| [[R-Phycoerythrin|R-फाइकोएरिथ्रिन]] (PE)
| 480;565
| 480;565
| 578
| 578
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|  
|  
|-
|-
| PE-Cy5 conjugates
| PE-Cy5 संयुग्मन
| 480;565;650
| 480;565;650
| 670
| 670
|  
|  
| aka Cychrome, R670, Tri-Color, Quantum Red
| aka साइक्रोम, R670, त्रि-रंग, परिमाण लाल
|-
|-
| PE-Cy7 conjugates
| PE-Cy7 संयुग्मन
| 480;565;743
| 480;565;743
| 767
| 767
Line 161: Line 161:
|  
|  
|-
|-
| [[Red 613]]
| [[Red 613|लाल 613]]
| 480;565
| 480;565
| 613
| 613
|  
|  
| PE-Texas Red
| PE- टेक्सस लाल
|-
|-
| PerCP
| PerCP
Line 171: Line 171:
| 675
| 675
| 35kDa
| 35kDa
| Peridinin chlorophyll protein
| पेरिडिनिन पर्णहरिमा प्रोटीन
|-
|-
| [[TruRed]]
| [[TruRed|Truलाल]]
| 490,675
| 490,675
| 695
| 695
|  
|  
| PerCP-Cy5.5 conjugate
| PerCP-Cy5.5 संयुग्मन
|-
|-
| FluorX
| स्त्रावX
| 494
| 494
| 520
| 520
|  587
|  587
| (GE Healthcare)
| (GE स्वास्थ्य सेवा)
|-
|-
| [[Fluorescein]]
| [[Fluorescein|फ्लोरेसिन]]
| 495
| 495
| 519
| 519
| 389
| 389
| FITC; pH sensitive
| FITC; pH संवेदनशील
|-
|-
| BODIPY-FL
| BODIPY-FL
Line 197: Line 197:
|  
|  
|-
|-
|G-Dye100
|G-रंजक100
|498
|498
|524
|524
|
|
|suitable for protein labeling and electrophoresis
|प्रोटीन लेबलिंग और वैद्युतकणसंचलन के लिए उपयुक्त है
|-
|-
|G-Dye200
|G-रंजक200
|554
|554
|575
|575
|
|
|suitable for protein labeling and electrophoresis
|प्रोटीन लेबलिंग और वैद्युतकणसंचलन के लिए उपयुक्त है
|-
|-
|G-Dye300
|G-रंजक300
|648
|648
|663
|663
|
|
|suitable for protein labeling and electrophoresis
|प्रोटीन लेबलिंग और वैद्युतकणसंचलन के लिए उपयुक्त है
|-
|-
|G-Dye400
|G-रंजक400
|736
|736
|760
|760
|
|
|suitable for protein labeling and electrophoresis
|प्रोटीन लेबलिंग और वैद्युतकणसंचलन के लिए उपयुक्त है
|-
|-
| Cy2
| Cy2
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| TRITC
| TRITC
|-
|-
| [[X-Rhodamine]]
| [[X-Rhodamine|X-रोडैमीन]]
| 570
| 570
| 576
| 576
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| XRITC
| XRITC
|-
|-
| [[Lissamine Rhodamine B]]
| [[Lissamine Rhodamine B|लिसामाइन रोडामाइन B]]
| 570
| 570
| 590
| 590
Line 281: Line 281:
|  
|  
|-
|-
| [[Texas Red]]
| [[Texas Red|टेक्सास लाल]]
| 589
| 589
| 615
| 615
| 625
| 625
| Sulfonyl chloride
| सल्फोनील विरंजक
|-
|-
| Allophycocyanin (APC)
| एलोफाइकोसायनिन (APC)
| 650
| 650
| 660
| 660
Line 293: Line 293:
|  
|  
|-
|-
| APC-Cy7 conjugates
| APC-Cy7 संयुग्मन
| 650;755
| 650;755
| 767
| 767
|  
|  
| Far Red
| सुदूर लाल
|}
|}
लघुरूप:
लघुरूप:
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{| class="wikitable sortable"
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|-
|-
! Dye
! रंजक
! Ex (nm)
! Ex (nm)
! Em (nm)
! Em (nm)
! MW
! MW
! Notes
! टिप्पणि
|-
|-
| [[Hoechst stain|Hoechst]] 33342
| [[Hoechst stain|होचस्ट]] 33342
| 343
| 343
| 483
| 483
| 616
| 616
| AT-selective
| AT-चयनशील
|-
|-
|  [[DAPI]]
|  [[DAPI]]
Line 324: Line 324:
| 455
| 455
|  
|  
| AT-selective
| AT-चयनशील
|-
|-
|  [[Hoechst stain|Hoechst]] 33258
|  [[Hoechst stain|होचस्ट]] 33258
| 345
| 345
| 478
| 478
| 624
| 624
| AT-selective
| AT-चयनशील
|-
|-
|  [[SYTOX]] Blue
|  [[SYTOX]] Blue
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| 480
| 480
| ~400
| ~400
| DNA
| डीएनए
|-
|-
|  [[Chromomycin A3]]
|  [[Chromomycin A3|क्रोमोमाइसिन A3]]
| 445
| 445
| 575
| 575
|  
|  
| CG-selective
| CG-चयनशील
|-
|-
|  [[Mithramycin]]
|  [[Mithramycin|मिथ्रामाइसिन]]
| 445
| 445
| 575
| 575
Line 356: Line 356:
|  
|  
|-
|-
|  [[Ethidium Bromide]]
|  [[Ethidium Bromide|ऐथिडियम ब्रोमाइड]]
| 210;285
| 210;285
| 605
| 605
| 394
| 394
| in aqueous solution
| जलीय विलयन में
|-
|-
|[[GelRed]]
|[[GelRed|Gelलाल]]
|290;520
|290;520
|595
|595
|1239
|1239
|Non-toxic substitute for Ethidium Bromide
|इथिडियम ब्रोमाइड के लिए गैर विषैले विकल्प
|-
|-
|  [[Acridine orange|Acridine Orange]]
|  [[Acridine orange|Acridine Orange]]
Line 372: Line 372:
| 530/640
| 530/640
|  
|  
| DNA/RNA
| डीएनए/आरएनए
|-
|-
|  [[SYTOX]] Green
|  [[SYTOX]] Green
Line 378: Line 378:
| 523
| 523
| ~600
| ~600
| DNA
| डीएनए
|-
|-
|  TOTO-1, TO-PRO-1
|  TOTO-1, TO-PRO-1
Line 384: Line 384:
| 533
| 533
|  
|  
| Vital stain, TOTO: Cyanine Dimer
| जीवद अभिरंजक, TOTO: सायनिन डिमर
|-
|-
|  TO-PRO: Cyanine Monomer
|  TO-PRO: Cyanine Monomer
Line 398: Line 398:
| 615
| 615
| -
| -
| (Biostatus) (red excitation dark)
| (बायोस्टेटस) (लाल उत्तेजन अँधेरा)
|-
|-
|  [[Propidium]] Iodide (PI)
|  [[Propidium]] Iodide (PI)
Line 410: Line 410:
| 712;607
| 712;607
|  472
|  472
|  DNA (543ex/712em), RNA (590ex/607em)
|  डीएनए (543ex/712em), आरएनए (590ex/607em)
|-
|-
|  7-AAD
|  7-AAD
Line 416: Line 416:
| 647
| 647
|  
|  
| 7-aminoactinomycin D, CG-selective
| 7-aminoactinomycin D, CG-चयनशील
|-
|-
|  [[SYTOX]] Orange
|  [[SYTOX]] Orange
Line 422: Line 422:
| 570
| 570
| ~500
| ~500
| DNA
| डीएनए
|-
|-
|  TOTO-3, TO-PRO-3
|  TOTO-3, TO-PRO-3
Line 447: Line 447:
{| class="wikitable sortable"
{| class="wikitable sortable"
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|-
! Dye
! रंजक
! Ex (nm)
! Ex (nm)
! Em (nm)
! Em (nm)
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{| class="wikitable sortable"
{| class="wikitable sortable"
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! Dye
! रंजक
! Ex (nm)
! Ex (nm)
! Em (nm)
! Em (nm)
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|  
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|  mKeima-Red
|  mKeima-लाल
| 440
| 440
| 620
| 620
Line 899: Line 899:
| monomer (Evrogen)
| monomer (Evrogen)
|-
|-
|  DsRed monomer
|  Dsलाल monomer
| 556
| 556
| 586
| 586
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| monomer, (Clontech)
| monomer, (Clontech)
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|-
|  DsRed2 ("RFP")
|  Dsलाल2 ("RFP")
| 563
| 563
| 582
| 582
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| dimer, (Evrogen)
| dimer, (Evrogen)
|-
|-
|  AsRed2
|  Asलाल2
| 576
| 576
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Line 953: Line 953:
| monomer, ([[Roger Tsien|Tsien lab]])
| monomer, ([[Roger Tsien|Tsien lab]])
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|-
|  J-Red
|  J-लाल
| 584
| 584
| 610
| 610
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| dimer
| dimer
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| [[phycoerythrin|R-phycoerythrin]] (RPE)
| [[phycoerythrin|R-फाइकोएरिथ्रिन]] (RPE)
| 565 >498
| 565 >498
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| heterotrimer<ref name="Columbia Biosciences"/>
| heterotrimer<ref name="Columbia Biosciences"/>
|-
|-
| [[phycoerythrin|B-phycoerythrin]] (BPE)
| [[phycoerythrin|B-फाइकोएरिथ्रिन]] (BPE)
| 545
| 545
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| 572
Line 989: Line 989:
| monomer
| monomer
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|  HcRed1
|  Hcलाल1
| 588
| 588
| 618
| 618
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== बाहरी संबंध ==
== बाहरी संबंध ==
* [https://archive.today/20121205013840/http://www.fluorophores.org/ The Database of fluorescent dyes]
* [https://archive.today/20121205013840/http://www.fluorophores.org/ The Database of fluorescent रंजकs]
* [https://web.archive.org/web/20141020225338/http://pingu.salk.edu/flow/fluo.html Table of fluorochromes]
* [https://web.archive.org/web/20141020225338/http://pingu.salk.edu/flow/fluo.html Table of fluorochromes]
* [http://www.invitrogen.com/site/us/en/home/References/Molecular-Probes-The-Handbook.html The Molecular Probes Handbook] - a comprehensive resource for fluorescence technology and its applications.
* [http://www.invitrogen.com/site/us/en/home/References/Molecular-Probes-The-Handbook.html The Molecular Probes Handbook] - a comprehensive resource for fluorescence technology and its applications.

Revision as of 10:52, 18 February 2023

For uses and theory of fluorescence, see Fluorescence in the life sciences.
File:FISH 13 21.jpg
एक फ्लोरोफोर-लेबल मानव कोशिका।

एक फ्लोरोफोर (या फ्लोरोक्रोम, एक क्रोमोफोर के समान) एक प्रतिदीप्ति रासायनिक यौगिक है जो प्रकाश उत्तेजना पर प्रकाश को फिर से उत्सर्जित कर सकता है। फ्लोरोफोरस में आमतौर पर कई संयुक्त सुगन्धित समूह होते हैं, या कई पीआई बांड | π बांड के साथ प्लानर या चक्रीय अणु होते हैं।[1]

Fluorophores कभी-कभी अकेले उपयोग किया जाता है, तरल पदार्थ में डाई ट्रेसिंग के रूप में, कुछ संरचनाओं के धुंधला होने के लिए डाई के रूप में, एंजाइमों के एक सब्सट्रेट के रूप में, या एक जांच या संकेतक के रूप में (जब इसकी प्रतिदीप्ति ध्रुवीयता या आयनों जैसे पर्यावरणीय पहलुओं से प्रभावित होती है)। अधिक आम तौर पर वे एक मैक्रो मोलेक्यूल के लिए सहसंयोजक बंधन होते हैं, जो एफाइन या बायोएक्टिव अभिकर्मकों (एंटीबॉडी, पेप्टाइड्स, न्यूक्लिक एसिड) के लिए एक मार्कर (या डाई, या टैग, या रिपोर्टर) के रूप में कार्य करते हैं। Fluorophores विशेष रूप से विभिन्न प्रकार के विश्लेषणात्मक तरीकों, यानी, प्रतिदीप्ति माइक्रोस्कोप और प्रतिदीप्ति स्पेक्ट्रोस्कोपी में ऊतकों, कोशिकाओं या सामग्रियों को दागने के लिए उपयोग किया जाता है।

fluorescein, इसके अमाइन-रिएक्टिव आइसोथियोसाइनेट व्युत्पन्न फ्लोरेसिन आइसोथियोसाइनेट (FITC) के माध्यम से, सबसे लोकप्रिय फ्लोरोफोरस में से एक रहा है। एंटीबॉडी लेबलिंग से, अनुप्रयोग carboxyfluorescein (FAM), TET, ...) की बदौलत न्यूक्लिक एसिड में फैल गए हैं। अन्य ऐतिहासिक रूप से आम फ्लोरोफोरस रोडामाइन (TRITC), कूमेरिन और जाती के डेरिवेटिव हैं।[2] फ़्लोरोफ़ोर्स की नई पीढ़ी, जिनमें से कई मालिकाना हैं, अक्सर बेहतर प्रदर्शन करते हैं, तुलनात्मक उत्तेजना और उत्सर्जन के साथ पारंपरिक रंगों की तुलना में अधिक फोटोस्टेबल, उज्जवल और/या कम पीएच-संवेदनशील होते हैं।[3][4]


प्रतिदीप्ति

फ्लोरोफोर एक विशिष्ट तरंग दैर्ध्य की प्रकाश ऊर्जा को अवशोषित करता है और एक लंबी तरंग दैर्ध्य पर प्रकाश का उत्सर्जन करता है। अवशोषित तरंग दैर्ध्य, क्वांटम दक्षता, और उत्सर्जन से पहले का समय फ्लोरोफोर संरचना और उसके रासायनिक वातावरण दोनों पर निर्भर करता है, क्योंकि इसकी उत्तेजित अवस्था में अणु आसपास के अणुओं से संपर्क करता है। अधिकतम अवशोषण की तरंग दैर्ध्य (≈ उत्तेजन) और उत्सर्जन (उदाहरण के लिए, अवशोषण/उत्सर्जन = 485 एनएम/517 एनएम) किसी दिए गए फ्लोरोफोर को संदर्भित करने के लिए उपयोग किए जाने वाले विशिष्ट शब्द हैं, लेकिन पूरे स्पेक्ट्रम पर विचार करना महत्वपूर्ण हो सकता है। उत्तेजना तरंग दैर्ध्य स्पेक्ट्रम एक बहुत ही संकीर्ण या व्यापक बैंड हो सकता है, या यह कटऑफ स्तर से परे हो सकता है। उत्सर्जन स्पेक्ट्रम आमतौर पर उत्तेजना स्पेक्ट्रम की तुलना में तेज होता है, और यह लंबी तरंग दैर्ध्य और तदनुसार कम ऊर्जा वाला होता है। उत्तेजना ऊर्जा दृश्यमान स्पेक्ट्रम के माध्यम से पराबैंगनी से होती है, और उत्सर्जन ऊर्जा प्रकाश से निकट अवरक्त क्षेत्र में जारी रह सकती है।

फ्लोरोफोरस की मुख्य विशेषताएं हैं:

  • अधिकतम उत्तेजना और उत्सर्जन तरंग दैर्ध्य (नैनोमीटर (एनएम) में व्यक्त): उत्तेजना और उत्सर्जन स्पेक्ट्रा में शिखर से मेल खाती है (आमतौर पर एक चोटी प्रत्येक)।
  • मोलर अवशोषण गुणांक (मोलर में-1सेमी-1): दिए गए तरंगदैर्घ्य पर अवशोषित प्रकाश की मात्रा को विलयन में फ्लोरोफोर की सांद्रता से जोड़ता है।
  • क्वांटम उपज: घटना प्रकाश से उत्सर्जित प्रतिदीप्ति तक स्थानांतरित ऊर्जा की दक्षता (= अवशोषित फोटॉनों में उत्सर्जित फोटॉनों की संख्या)।
  • लाइफटाइम (पिकोसेकंड्स में): फ्लोरोफोरे की जमीनी स्थिति में लौटने से पहले उत्तेजित अवस्था की अवधि। यह उत्साहित फ्लोरोफोरस की आबादी को मूल राशि के 1/e (≈0.368) तक क्षय होने में लगने वाले समय को संदर्भित करता है।
  • स्टोक्स शिफ्ट: अधिकतम उत्तेजना और अधिकतम उत्सर्जन तरंग दैर्ध्य के बीच का अंतर।
  • गहरा अंश: प्रतिदीप्ति उत्सर्जन में सक्रिय अणुओं का अनुपात। क्वांटम डॉट्स के लिए, लंबे समय तक एकल-अणु माइक्रोस्कोपी ने दिखाया कि सभी कणों का 20-90% प्रतिदीप्ति उत्सर्जित नहीं करता है।[5] दूसरी ओर, संयुग्मित बहुलक नैनोकण (पीडॉट्स) उनके प्रतिदीप्ति में लगभग कोई काला अंश नहीं दिखाते हैं।[6] प्रतिदीप्त प्रोटीन में प्रोटीन मिसफॉल्डिंग या दोषपूर्ण क्रोमोफोर गठन से एक गहरा अंश हो सकता है।[7]

ये विशेषताएँ फोटोब्लीचिंग या फोटोरेसिस्टेंस (निरंतर प्रकाश उत्तेजना पर प्रतिदीप्ति की हानि) सहित अन्य गुणों को चलाती हैं। अन्य मापदंडों पर विचार किया जाना चाहिए, क्योंकि फ्लोरोफोर अणु की ध्रुवीयता, फ्लोरोफोर आकार और आकार (अर्थात प्रतिदीप्ति अनिसोट्रॉपी पैटर्न के लिए), और अन्य कारक फ्लोरोफोरस के व्यवहार को बदल सकते हैं।

फ्लोरोफोरस का उपयोग अन्य फ्लोरोसेंट रंजक के प्रतिदीप्ति को बुझाने के लिए भी किया जा सकता है (लेख क्वेंचिंग (प्रतिदीप्ति) देखें) या उनके प्रतिदीप्ति को और भी लंबी तरंग दैर्ध्य पर रिले करने के लिए (देखें लेख फोर्स्टर अनुनाद ऊर्जा हस्तांतरण (FRET))।

प्रतिदीप्ति#समीकरण पर अधिक देखें।

आकार (आणविक भार)

अधिकांश फ़्लोरोफ़ोर्स 20 - 100 परमाणुओं (200 - 1000 डाल्टन (इकाई) के कार्बनिक छोटे अणु होते हैं - ग्राफ्टेड संशोधनों और संयुग्मित अणुओं के आधार पर आणविक भार अधिक हो सकता है), लेकिन बहुत बड़े प्राकृतिक फ़्लोरोफ़ोर्स भी होते हैं जो प्रोटीन होते हैं: हरा फ्लोरोसेंट प्रोटीन (जीएफपी) 27 kDalton (यूनिट) है और कई फ़ाइकोबिलिप्रोटिन (PE, APC...) ≈240kDa हैं। 2020 में, सबसे छोटे ज्ञात फ्लोरोफोर को 3-हाइड्रोक्सीसोनिकोटिनल्डिहाइड |[8] क्वांटम डॉट्स जैसे प्रतिदीप्ति कण: 2-10 एनएम व्यास, 100-100,000 परमाणु, भी फ्लोरोफोरस माने जाते हैं।Cite error: Closing </ref> missing for <ref> tag[9] फ्लोरोसेंट प्रोटीन जीएफपी (हरा), वाईएफपी (पीला) और आरएफपी (लाल) एक उपयुक्त प्लाज्मिड वाहक के संक्रमण के बाद कोशिकाओं में संश्लेषित एक संलयन प्रोटीन बनाने के लिए अन्य विशिष्ट प्रोटीन से जुड़ा जा सकता है।

गैर-प्रोटीन कार्बनिक फ्लोरोफोरस निम्नलिखित प्रमुख रासायनिक परिवारों से संबंधित हैं:

ये फ्लोरोफोरस डेलोकलाइज्ड इलेक्ट्रॉनों के कारण प्रतिदीप्त होते हैं जो एक बैंड को कूद सकते हैं और अवशोषित ऊर्जा को स्थिर कर सकते हैं। उदाहरण के लिए, बेंजीन, सबसे सरल सुगंधित हाइड्रोकार्बन में से एक है, जो 254 एनएम पर उत्तेजित होता है और 300 एनएम पर उत्सर्जित होता है।[10] यह फ्लोरोफोरस को क्वांटम डॉट्स से अलग करता है, जो फ्लोरोसेंट सेमीकंडक्टर nanoparticle्स हैं।

उन्हें प्रोटीन से विशिष्ट कार्यात्मक समूहों से जोड़ा जा सकता है, जैसे - एमिनो समूह (सक्रिय एस्टर, कार्बाक्सिलेट, आइसोथियोसाइनेट, हाइड्राज़ीन), कार्बोक्सिल समूह (कार्बोडाइमाइड), थियोल (पुरुष नाम, एसिटाइल ब्रोमाइड), कार्बनिक अजाइड (क्लिक रसायन या गैर-केमिस्ट्री के माध्यम से) विशेष रूप से (glutaraldehyde))।

इसके अतिरिक्त, इसके गुणों को बदलने के लिए विभिन्न कार्यात्मक समूह मौजूद हो सकते हैं, जैसे कि घुलनशीलता, या विशेष गुण प्रदान करते हैं, जैसे कि बोरोनिक एसिड जो शर्करा या कई कार्बोक्सिल समूहों को कुछ उद्धरणों से बाँधने के लिए बाँधता है। जब डाई में एरोमैटिक सिस्टम के विपरीत सिरों पर एक इलेक्ट्रॉन-दान और एक इलेक्ट्रॉन-स्वीकार करने वाला समूह होता है, तो यह डाई संभवतः पर्यावरण की ध्रुवीयता (सॉल्वैटोक्रोमिज्म) के प्रति संवेदनशील होगी, इसलिए इसे पर्यावरण-संवेदनशील कहा जाता है। अक्सर रंगों का उपयोग कोशिकाओं के अंदर किया जाता है, जो आवेशित अणुओं के लिए अभेद्य होते हैं, इसके परिणामस्वरूप कार्बोक्सिल समूह एक एस्टर में परिवर्तित हो जाते हैं, जिसे कोशिकाओं के अंदर एस्टरेस द्वारा हटा दिया जाता है, जैसे, विभाजित करना और fluorescein-diacetate

निम्नलिखित डाई परिवार ट्रेडमार्क समूह हैं, और आवश्यक रूप से संरचनात्मक समानताएं साझा नहीं करते हैं।

File:DAPIMitoTrackerRedAlexaFluor488BPAE.jpg
बोवाइन पल्मोनरी आर्टरी एंडोथेलियल सेल न्यूक्लियर डीएपीआई के साथ नीले रंग का, माइटोकॉन्ड्रिया माइटोट्रैकर रेड सीएमएक्सआरओएस के साथ लाल रंग का, और एलेक्सा फ्लोर 488 फैलोलाइडिन के साथ एफ actin स्टेन्ड ग्रीन और एक फ्लोरोसेंट माइक्रोस्कोप पर चित्रित।

अक्सर सामना किए जाने वाले फ्लोरोफोरेस के उदाहरण

प्रतिक्रियाशील और संयुग्मित रंग

रंजक Ex (nm) Em (nm) MW टिप्पणियाँ
हाइड्रोक्सीकाउमारिन 325 386 331 सक्सिनिमिडाइल एस्टर
एमिनोकूमरिन 350 445 330 सक्सिनिमिडाइल एस्टर
मेथोक्सीकूमरिन 360 410 317 सक्सिनिमिडाइल एस्टर
कैस्कैड नील (375);401 423 596 हाइड्रैज़ाइड
प्रशांत नीला 403 455 406 मैलेमाइड
प्रशांत नारंगी 403 551
3-हाइड्रोक्सीसोनिकोटिनल्डिहाइड 385 525 123 QY 0.15; pH संवेदनशील
लूसिफर पीला 425 528
NBD 466 539 294 NBD-X
R-फाइकोएरिथ्रिन (PE) 480;565 578 240 k
PE-Cy5 संयुग्मन 480;565;650 670 aka साइक्रोम, R670, त्रि-रंग, परिमाण लाल
PE-Cy7 संयुग्मन 480;565;743 767
लाल 613 480;565 613 PE- टेक्सस लाल
PerCP 490 675 35kDa पेरिडिनिन पर्णहरिमा प्रोटीन
Truलाल 490,675 695 PerCP-Cy5.5 संयुग्मन
स्त्रावX 494 520 587 (GE स्वास्थ्य सेवा)
फ्लोरेसिन 495 519 389 FITC; pH संवेदनशील
BODIPY-FL 503 512
G-रंजक100 498 524 प्रोटीन लेबलिंग और वैद्युतकणसंचलन के लिए उपयुक्त है
G-रंजक200 554 575 प्रोटीन लेबलिंग और वैद्युतकणसंचलन के लिए उपयुक्त है
G-रंजक300 648 663 प्रोटीन लेबलिंग और वैद्युतकणसंचलन के लिए उपयुक्त है
G-रंजक400 736 760 प्रोटीन लेबलिंग और वैद्युतकणसंचलन के लिए उपयुक्त है
Cy2 489 506 714 QY 0.12
Cy3 (512);550 570;(615) 767 QY 0.15
Cy3B 558 572;(620) 658 QY 0.67
Cy3.5 581 594;(640) 1102 QY 0.15
Cy5 (625);650 670 792 QY 0.28
Cy5.5 675 694 1272 QY 0.23
Cy7 743 767 818 QY 0.28
TRITC 547 572 444 TRITC
X-रोडैमीन 570 576 548 XRITC
लिसामाइन रोडामाइन B 570 590
टेक्सास लाल 589 615 625 सल्फोनील विरंजक
एलोफाइकोसायनिन (APC) 650 660 104 k
APC-Cy7 संयुग्मन 650;755 767 सुदूर लाल

लघुरूप:

न्यूक्लिक एसिड रंजक

रंजक Ex (nm) Em (nm) MW टिप्पणि
होचस्ट 33342 343 483 616 AT-चयनशील
DAPI 345 455 AT-चयनशील
होचस्ट 33258 345 478 624 AT-चयनशील
SYTOX Blue 431 480 ~400 डीएनए
क्रोमोमाइसिन A3 445 575 CG-चयनशील
मिथ्रामाइसिन 445 575
YOYO-1 491 509 1271
ऐथिडियम ब्रोमाइड 210;285 605 394 जलीय विलयन में
Gelलाल 290;520 595 1239 इथिडियम ब्रोमाइड के लिए गैर विषैले विकल्प
Acridine Orange 503 530/640 डीएनए/आरएनए
SYTOX Green 504 523 ~600 डीएनए
TOTO-1, TO-PRO-1 509 533 जीवद अभिरंजक, TOTO: सायनिन डिमर
TO-PRO: Cyanine Monomer
Thiazole Orange 510 530
CyTRAK Orange 520 615 - (बायोस्टेटस) (लाल उत्तेजन अँधेरा)
Propidium Iodide (PI) 536 617 668.4
LDS 751 543;590 712;607 472 डीएनए (543ex/712em), आरएनए (590ex/607em)
7-AAD 546 647 7-aminoactinomycin D, CG-चयनशील
SYTOX Orange 547 570 ~500 डीएनए
TOTO-3, TO-PRO-3 642 661
DRAQ5 600/647 697 413 (Biostatus) (usable excitation down to 488)
DRAQ7 599/644 694 ~700 (Biostatus) (usable excitation down to 488)


सेल फ़ंक्शन रंग

रंजक Ex (nm) Em (nm) MW Notes
Indo-1 361/330 490/405 1010 AM ester, low/high calcium (Ca2+)
Fluo-3 506 526 855 AM ester. pH > 6
Fluo-4 491/494 516 1097 AM ester. pH 7.2
DCFH 505 535 529 2'7'Dichorodihydrofluorescein, oxidized form
DHR 505 534 346 Dihydrorhodamine 123, oxidized form, light catalyzes oxidation
SNARF 548/579 587/635 pH 6/9


प्रतिदीप्त प्रोटीन

रंजक Ex (nm) Em (nm) MW QY BR PS Notes
GFP (Y66H mutation) 360 442
GFP (Y66F mutation) 360 508
EBFP 380 440 0.18 0.27 monomer
EBFP2 383 448 20 monomer
Azurite 383 447 15 monomer
GFPuv 385 508
T-Sapphire 399 511 0.60 26 25 weak dimer
Cerulean 433 475 0.62 27 36 weak dimer
mCFP 433 475 0.40 13 64 monomer
mTurquoise2 434 474 0.93 28 monomer
ECFP 434 477 0.15 3
CyPet 435 477 0.51 18 59 weak dimer
GFP (Y66W mutation) 436 485
mKeima-लाल 440 620 0.24 3 monomer (MBL)
TagCFP 458 480 29 dimer (Evrogen)
AmCyan1 458 489 0.75 29 tetramer, (Clontech)
mTFP1 462 492 54 dimer
GFP (S65A mutation) 471 504
Midoriishi Cyan 472 495 0.9 25 dimer (MBL)
Wild Type GFP 396,475 508 26k 0.77
GFP (S65C mutation) 479 507
TurboGFP 482 502 26 k 0.53 37 dimer, (Evrogen)
TagGFP 482 505 34 monomer (Evrogen)
GFP (S65L mutation) 484 510
Emerald 487 509 0.68 39 0.69 weak dimer, (Invitrogen)
GFP (S65T mutation) 488 511
EGFP 488 507 26k 0.60 34 174 weak dimer, (Clontech)
Azami Green 492 505 0.74 41 monomer (MBL)
ZsGreen1 493 505 105k 0.91 40 tetramer, (Clontech)
TagYFP 508 524 47 monomer (Evrogen)
EYFP 514 527 26k 0.61 51 60 weak dimer, (Clontech)
Topaz 514 527 57 monomer
Venus 515 528 0.57 53 15 weak dimer
mCitrine 516 529 0.76 59 49 monomer
YPet 517 530 0.77 80 49 weak dimer
TurboYFP 525 538 26 k 0.53 55.7 dimer, (Evrogen)
ZsYellow1 529 539 0.65 13 tetramer, (Clontech)
Kusabira Orange 548 559 0.60 31 monomer (MBL)
mOrange 548 562 0.69 49 9 monomer
Allophycocyanin (APC) 652 657.5 105 kDa 0.68 heterodimer, crosslinked[11]
mKO 548 559 0.60 31 122 monomer
TurboRFP 553 574 26 k 0.67 62 dimer, (Evrogen)
tdTomato 554 581 0.69 95 98 tandem dimer
TagRFP 555 584 50 monomer (Evrogen)
Dsलाल monomer 556 586 ~28k 0.1 3.5 16 monomer, (Clontech)
Dsलाल2 ("RFP") 563 582 ~110k 0.55 24 (Clontech)
mStrawberry 574 596 0.29 26 15 monomer
TurboFP602 574 602 26 k 0.35 26 dimer, (Evrogen)
Asलाल2 576 592 ~110k 0.21 13 tetramer, (Clontech)
mRFP1 584 607 ~30k 0.25 monomer, (Tsien lab)
J-लाल 584 610 0.20 8.8 13 dimer
R-फाइकोएरिथ्रिन (RPE) 565 >498 573 250 kDa 0.84 heterotrimer[11]
B-फाइकोएरिथ्रिन (BPE) 545 572 240 kDa 0.98 heterotrimer[11]
mCherry 587 610 0.22 16 96 monomer
Hcलाल1 588 618 ~52k 0.03 0.6 dimer, (Clontech)
Katusha 588 635 23 dimer
P3 614 662 ~10,000 kDa phycobilisome complex[11]
Peridinin Chlorophyll (PerCP) 483 676 35 kDa trimer[11]
mKate (TagFP635) 588 635 15 monomer (Evrogen)
TurboFP635 588 635 26 k 0.34 22 dimer, (Evrogen)
mPlum 590 649 51.4 k 0.10 4.1 53
mRaspberry 598 625 0.15 13 monomer, faster photobleach than mPlum
mScarlet 569 594 0.70 71 277 monomer[12]

लघुरूप:

  • पूर्व (एनएम): नैनोमीटर में उत्तेजना तरंगदैर्ध्य
  • एम (एनएम): नैनोमीटर में उत्सर्जन तरंग दैर्ध्य
  • MW: आणविक भार
  • QY: क्वांटम यील्ड
  • बीआर: चमक: मोलर अवशोषण गुणांक * क्वांटम यील्ड / 1000
  • पुनश्च: फोटोस्थिरता: समय [सेकंड] चमक को 50% तक कम करने के लिए

अनुप्रयोग

Further information: Fluorescence in the life sciences

फ्लोरोफोरस का जैव रसायन और प्रोटीन अध्ययन के क्षेत्र में विशेष महत्व है, उदाहरण के लिए, इम्यूनोफ्लोरेसेंस में लेकिन कोशिका विश्लेषण में भी,[13] उदा. इम्युनोहिस्टोकैमिस्ट्री[3] [14] और छोटे अणु सेंसर।[15][16]


जीवन विज्ञान के बाहर उपयोग करता है

File:Sea dye marker.JPG
फ्लोरोसेंट समुद्री डाई

इसके अतिरिक्त फ्लोरोसेंट रंगों का उद्योग में व्यापक उपयोग होता है, जो नियॉन रंगों के नाम से जाना जाता है, जैसे:

  • कपड़े धोने के डिटर्जेंट में कपड़ा रंगाई और ऑप्टिकल चमकदार में बहु-टन पैमाने का उपयोग
  • उन्नत सौंदर्य प्रसाधन योगों; सुरक्षा उपकरण और कपड़े
  • कार्बनिक प्रकाश उत्सर्जक डायोड (ओएलईडी)
  • ललित कला और डिजाइन (पोस्टर और पेंटिंग)
  • कीटनाशकों और प्रायोगिक दवाओं के लिए सिनर्जिस्ट
  • चमक जैसा प्रभाव देने के लिए हाइलाइटर्स में डाई के रूप में
  • सौर पैनल अधिक प्रकाश / तरंग दैर्ध्य एकत्र करने के लिए
  • प्रतिदीप्त समुद्री डाई का उपयोग हवाई खोज और बचाव दल को पानी में वस्तुओं का पता लगाने में मदद करने के लिए किया जाता है

यह भी देखें

संदर्भ

  1. ↑ Juan Carlos Stockert, Alfonso Blázquez-Castro (2017). "Chapter 3 Dyes and Fluorochromes". Fluorescence Microscopy in Life Sciences. Bentham Science Publishers. pp. 61–95. ISBN 978-1-68108-519-7. Retrieved 24 December 2017.
  2. ↑ Rietdorf J (2005). Microscopic Techniques. Advances in Biochemical Engineering / Biotechnology. Berlin: Springer. pp. 246–9. ISBN 3-540-23698-8. Retrieved 2008-12-13.
  3. ↑ 3.0 3.1 Tsien RY; Waggoner A (1995). "Fluorophores for confocal microscopy". In Pawley JB (ed.). Handbook of biological confocal microscopy. New York: Plenum Press. pp. 267–74. ISBN 0-306-44826-2. Retrieved 2008-12-13.
  4. ↑ Lakowicz, JR (2006). Principles of fluorescence spectroscopy (3rd ed.). Springer. p. 954. ISBN 978-0-387-31278-1.
  5. ↑ Pons T, Medintz IL, Farrell D, Wang X, Grimes AF, English DS, Berti L, Mattoussi H (2011). "Single-molecule colocalization studies shed light on the idea of fully emitting versus dark single quantum dots". Small. 7 (14): 2101–2108. doi:10.1002/smll.201100802. PMID 21710484.
  6. ↑ Koner AL, Krndija D, Hou Q, Sherratt DJ, Howarth M (2013). "Hydroxy-terminated conjugated polymer nanoparticles have near-unity bright fraction and reveal cholesterol-dependence of IGF1R nanodomains". ACS Nano. 7 (2): 1137–1144. doi:10.1021/nn3042122. PMC 3584654. PMID 23330847.
  7. ↑ Garcia-Parajo MF, Segers-Nolten GM, Veerman JA, Greve J, van Hulst NF (2000). "Real-time light-driven dynamics of the fluorescence emission in single green fluorescent protein molecules". PNAS. 97 (13): 7237–7242. Bibcode:2000PNAS...97.7237G. doi:10.1073/pnas.97.13.7237. PMC 16529. PMID 10860989.
  8. ↑ Cozens, Tom (2020-12-16). "Fluorescent molecule breaks size record for green-emitting dyes". chemistryworld.com. Retrieved 2021-12-03.
  9. ↑ Juan Carlos Stockert, Alfonso Blázquez-Castro (2017). "Chapter 4 Fluorescent Labels". Fluorescence Microscopy in Life Sciences. Bentham Science Publishers. pp. 96–134. ISBN 978-1-68108-519-7. Retrieved 24 December 2017.
  10. ↑ Omlc.ogi.edu
  11. ↑ 11.0 11.1 11.2 11.3 11.4 Columbia Biosciences
  12. ↑ Bindels, Daphne S.; Haarbosch, Lindsay; van Weeren, Laura; Postma, Marten; Wiese, Katrin E.; Mastop, Marieke; Aumonier, Sylvain; Gotthard, Guillaume; Royant, Antoine; Hink, Mark A.; Gadella, Theodorus W. J. (January 2017). "mScarlet: a bright monomeric red fluorescent protein for cellular imaging". Nature Methods (in English). 14 (1): 53–56. doi:10.1038/nmeth.4074. ISSN 1548-7105. PMID 27869816. S2CID 3539874.
  13. ↑ Sirbu, Dumitru; Luli, Saimir; Leslie, Jack; Oakley, Fiona; Benniston, Andrew C. (2019). "Enhanced in vivo Optical Imaging of the Inflammatory Response to Acute Liver Injury in C57BL/6 Mice Using a Highly Bright Near-Infrared BODIPY Dye". ChemMedChem (in English). 14 (10): 995–999. doi:10.1002/cmdc.201900181. ISSN 1860-7187. PMID 30920173. S2CID 85544665.
  14. ↑ Taki, Masayasu (2013). "Chapter 5. Imaging and sensing of cadmium in cells". In Astrid Sigel; Helmut Sigel; Roland K. O. Sigel (eds.). Cadmium: From Toxicology to Essentiality. Metal Ions in Life Sciences. Vol. 11. Springer. pp. 99–115. doi:10.1007/978-94-007-5179-8_5. PMID 23430772.
  15. ↑ Sirbu, Dumitru; Butcher, John B.; Waddell, Paul G.; Andras, Peter; Benniston, Andrew C. (2017-09-18). "Locally Excited State-Charge Transfer State Coupled Dyes as Optically Responsive Neuron Firing Probes" (PDF). Chemistry - A European Journal. 23 (58): 14639–14649. doi:10.1002/chem.201703366. ISSN 0947-6539. PMID 28833695.
  16. ↑ Jiang, Xiqian; Wang, Lingfei; Carroll, Shaina L.; Chen, Jianwei; Wang, Meng C.; Wang, Jin (2018-08-20). "Challenges and Opportunities for Small-Molecule Fluorescent Probes in Redox Biology Applications". Antioxidants & Redox Signaling. 29 (6): 518–540. doi:10.1089/ars.2017.7491. ISSN 1523-0864. PMC 6056262. PMID 29320869.


बाहरी संबंध

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