छोटी बूंद प्रतिधारा क्रोमैटोग्राफी

छोटी बूंद प्रतिधारा क्रोमैटोग्राफी (DCCC या DCC) को 1970 में तनीमुरा, पिसानो, इटो और बोमन द्वारा प्रस्तुत किया गया था। DCCC को तरल-तरल पृथक्करण का एक रूप माना जाता है, जिसमें प्रतिधारा वितरण और प्रतिधारा क्रोमैटोग्राफी सम्मिलित है, जो श्रृंखला में जुड़े ऊर्ध्वाधर काँच के स्तंभों के संग्रह में रखे गए एक तरल स्थिर चरण को नियोजित करता है। गतिशील चरण बूंदों के रूप में स्तंभों से होकर गुजरता है। DCCC तंत्र को निचले चरण के स्थिर और ऊपरी चरण को प्रत्येक कॉलम के नीचे प्रस्तुत किए जाने के साथ चलाया जा सकता है। या इसे ऊपरी चरण स्थिर और निचले चरण को स्तंभ के ऊपर से प्रस्तुत किया जा सकता है। दोनों ही स्थितियों में, गुरुत्वाकर्षण के कार्य को अलग-अलग घनत्व के दो अमिश्रणीय तरल पदार्थों को प्रभावित करने की अनुमति दी जाती है ताकि चिन्हित बूंदों का निर्माण किया जा सके जो स्तंभ के माध्यम से उठते या उतरते हैं। गतिशील चरण को एक दर पर स्पंदित किया जाता है जो बूंदों को बनाने की अनुमति देगा जो ऊपरी और निचले चरणों के बीच एक यौगिक के बड़े पैमाने पर स्थानांतरण को अधिकतम करता है। यौगिक जो ऊपरी चरण में अधिक घुलनशील होते हैं, स्तंभ के माध्यम से जल्दी से यात्रा करेंगे, जबकि यौगिक जो स्थिर चरण में अधिक घुलनशील होते हैं, वे रुके रहेंगे। पृथक्करण इसलिए होता है क्योंकि दो चरणों के बीच अलग-अलग यौगिक अलग-अलग वितरण करते हैं, जिसे विभाजन गुणांक कहा जाता है।

द्विध्रुवीय विलायक प्रणाली को सावधानी से तैयार किया जाना चाहिए ताकि यह डीसीसीसी कॉलम में उचित प्रदर्शन करे। बूंदों को बनाने के लिए विलायक प्रणाली को अतिरिक्त पायसीकरण के बिना दो चरणों का निर्माण करना चाहिए। दो चरणों की घनत्व भी पर्याप्त रूप से भिन्न होनी चाहिए ताकि चरण स्तंभ में एक दूसरे से आगे बढ़ सकें। कई DCCC सॉल्वेंट सिस्टम में क्लोरोफार्म  और पानी दोनों होते हैं। मौलिक प्रकाशन में उपयोग की जाने वाली विलायक प्रणाली क्लोरोफॉर्म, एसिटिक एसिड और जलीय 0.1 एम हाइड्रोक्लोरिक एसिड से बनाई गई थी। बाद के कई सॉल्वैंट्स सिस्टम क्लोरोफॉर्म, मेथनॉल और पानी के साथ बनाए गए थे, जिन्हें कभी-कभी ChMWat सॉल्वेंट सिस्टम के रूप में दर्शाया जाता है। एन-ब्यूटेनॉल, पानी और एसिटिक एसिड, पाइरीडीन या एन-प्रोपेनॉल जैसे संशोधक के साथ तैयार की गई सॉल्वेंट प्रणालियों को भी DCCC में कुछ सफलता मिली है। कुछ स्थितियों में, एसीटोनिट्रिल और मेथनॉल जैसे गैर-जलीय द्विध्रुवीय विलायक प्रणालियों का उपयोग किया गया है। DCCC और अन्य प्रकार की प्रतिधारा क्रोमैटोग्राफी तकनीकों के बीच मुख्य अंतर यह है कि यौगिकों के बड़े पैमाने पर स्थानांतरण को बढ़ाने के लिए चरणों का कोई जोरदार मिश्रण नहीं है जो उन्हें दो चरणों के बीच वितरित करने की अनुमति देता है। 1951 में Kies और Davis ने DCCC के समान एक उपकरण का वर्णन किया। उन्होंने खुली ट्यूबों की एक श्रृंखला बनाई जो एक कम घने स्थिर चरण के माध्यम से एक अधिक घने चरण को ड्रिप करने के लिए एक कैस्केड में व्यवस्थित की गई थी या इसके विपरीत, एक कम घने चरण को अधिक घने चरण के माध्यम से ड्रिप करने के लिए ट्यूब के नीचे प्रस्तुत किया जा सकता था।. 1954 में, केप्स द्वारा एक अंशांकन स्तंभ प्रस्तुत किया गया था, जो छिद्रित प्लास्टिक डिस्क वाले कक्षों में विभाजित एक सीसीसी स्तंभ जैसा दिखता था। समान DCCC-प्रकार के उपकरण A. E. Kostanyan और सहयोगियों द्वारा बनाए गए हैं जो लंबवत स्तंभों को नियोजित करते हैं जो झरझरा डिस्क वाले विभाजन में विभाजित होते हैं। एक बार जब कॉलम स्थिर चरण से भर जाते हैं, तो मोबाइल चरण को लगातार नहीं बल्कि दालों में पंप किया जाता है। एक स्पंदित पंपिंग क्रिया द्वारा बनाई गई विलायक गति मिश्रण और व्यवस्थित करती है जो प्रतिधारा क्रोमैटोग्राफी के अधिकांश सभी रूपों के लिए आम है।

अनुप्रयोग
DCCC को उनके क्रूड एक्सट्रेक्ट से विभिन्न प्रकार के phytochemical ्स को अलग करने के लिए नियोजित किया गया है।   प्राकृतिक उत्पाद पृथक्करणों की लंबी सूची में सम्मिलित हैं: सैपोनिन्स, उपक्षार, सेना ग्लाइकोसाइड्स, मोनोसैकराइड, ट्राइटरपीन ग्लाइकोसाइड्स, फ्लेवोन ग्लाइकोसाइड्स, ज़ैंथोन, iridoid ग्लाइकोसाइड्स, विटामिन बी 12 बी12, लिग्नन्स, क्लैडोनिया रंगीफेरिना, गैलिक एसिड एसिड, कैरोटीनॉयड, और ट्राइटरपीनोइड्स। DCCC उपकरणों का व्यावसायिक रूप से निर्माण और वितरण बुची और टोक्यो रिकाकीकाई (आईला) द्वारा किया गया है।